### 检测原理

2D荧光细胞活力测定法（2DLuminescent Cell Viability Assay）利用ATP依赖的荧光素酶催化反应，通过化学发光信号来测定细胞内ATP含量，从而评估细胞活力或定量活细胞数量。该方法具有广泛的检测线性范围、高灵敏度和良好的稳定性。在96孔板中，其检测细胞的数量范围为100至100,000个细胞之间表现出良好线性关系，但不同细胞类型的检测上限可能会有所不同。此外，操作流程简单，试剂盒中提供的检测试剂可直接使用，读数稳定且检测速度快，整个检测过程约需10分钟，无需清洗细胞或更换培养液。与其他常见细胞活力测定方法（如Calcein-AT、CCK-8等）相比，2DLuminescent Cell Viability Assay更加简便高效。

### 产品优势

2DLuminescent Cell Viability Assay（货号：abs50065）具有高灵敏度和宽线性范围，能够适应少量样品及大规模高通量筛选。其主要优势包括：

• 快速便捷：试剂盒中的检测试剂为即用型，检测速度快，完成检测仅需约10分钟。
• 高灵敏度：可检测最低10 nmol的ATP。
• 广泛的线性范围：在96孔板中，100到100,000个细胞范围内表现出良好的线性关系，不同细胞类型的上限各异。
• 高通量兼容：适用于少量样品检测和大量样品的高通量筛选。

### 使用方法

一、试剂准备

试剂融化：实验前一天将试剂从冰箱取出，置于4℃融化过夜。实验当天也可置于室温或22℃水浴融化，但注意水温不得超过25℃。试剂需在室温下平衡后使用，通常5mL包装需约10分钟，50mL包装需约20分钟。混匀时，轻轻颠倒5次以确保溶液均匀。

添加TritonX-100（货号：abs9149）：吸取所需体积的试剂，加入适量的TritonX-100，使其最终浓度达到0.2%。

二、检测步骤

1. 细胞培养：使用适合化学发光检测的96孔板（货号：abs7149），每孔接种100μL细胞（不宜超过10万个），同时设置不含细胞的培养液作为阴性对照。

2. ATP标准曲线的制作（可选）：将制备的ATP标准溶液用PBS稀释至适当浓度，96孔板每孔加入100μL标准品。

3. 细胞活力检测：按照设定的操作步骤进行细胞活力检测，利用多功能酶标仪进行化学发光检测，根据仪器要求调整相应参数。记录并计算细胞的相对活力。

三、注意事项

1. 温度：荧光素酶对温度敏感，反复冻融会导致活性下降，建议在-20℃避光保存。

2. 化学因素：荧光素酶的反应速率与化学环境密切相关，监测时需避免药物浓度过高的干扰。

3. 光敏感：试剂需避光保存，以防发光强度衰减。

4. ATP污染：操作时需佩戴口罩及乳胶手套，避免接触污染源。

通过使用ag尊龙凯时提供的2DLuminescent Cell Viability Assay，您能够高效、准确地测定细胞活力。对于细胞实验中的任何问题，我们欢迎与您共同交流。